你是否有去病理科借片或切白片时,工作人员问你借HE还是免疫组化?切防脱片还是普通片?切多厚的切片?烤不烤片?而感到茫然无措,四处求教,望这篇科普文可为你指点一二。
蜡块:患者内镜、穿刺或手术取下来的病变组织(老百姓讲的“肉”)都会送到病理科进行活检,最后组织被包裹在石蜡中,以蜡块的形式进行保存。后续的病理诊断以及相应检测都需要借助这些蜡块来进行。蜡块的大小、多少是根据组织大小来决定的。
蜡块是原始资料,医院是不外借。医院做检测、做会诊,该怎么办呢?这个时医院拿取一些东西。
借片:制好的玻片有两种可借,一种是HE切片,另一种是免疫组化切片。
白片:是指未经染色的石蜡组织切片。使用切片机从蜡块上切下来薄薄的一张蜡膜(通常是4μm),在水中展平,然后贴在一个玻璃片(载玻片)上,就做成了石蜡组织切片,即我们平时所说的白片。白片上带有手术或者穿刺取下来的组织。
红圈内为组织带有石蜡的白片
白片蜡卷:使用切片机把蜡膜切下来直接装在EP管中,这些无需贴在玻片上且呈卷状的蜡膜即是蜡卷。蜡卷上同样带有手术或者穿刺取下来的组织。
什么时候需要白片?什么时候需要蜡卷呢?分别需要多少?
病理诊断中一般需要借助三种手段:HE染色,免疫组化染色,分子检测。HE切片是诊断的基础,免疫组化染色是常规辅助手段,分子检测则是进一步的辅助手段及指导靶向用药。
HE染色和免疫组化染色都是在白片上直接进行的,而分子检测则根据项目的不同来提供相应材料。例如要进行FISH检测,则需要4μm的白片,白片的数量通常是所做探针的数量+2,即如果所做探针是3个,就准备5张切片。如果进行荧光定量PCR或测序,则需要7-10μm的蜡卷。蜡卷的数量取决于组织的大小。一般来讲,肿瘤面积大于4mm2,则需要5-8个卷,如肿瘤面积1-4mm2,则需要10-15个卷。当得不到蜡卷或病变组织需要做微切割时,也可将白片上的病变组织刮下来,再进行后续的操作。
切多厚的白片?
HE染色、免疫组化检查、FISH检测等要求白片的厚度一般是4μm,过薄、过厚都会影响检测结果的判断。荧光定量PCR、测序等项目,由于都需要把组织从玻璃片(载玻片)上刮取下来提取核酸,所以对厚度并没有严格的要求,一般6μm~10μm即可。当然,组织的大小、白片的厚度会影响组织的量,如果切片较薄、组织较小,就需要增加白片的数量。
烤不烤片?要不要防脱片?
防脱片大家叫法不一致,“粘附载玻片”“防脱载玻片”“涂胶片/挂胶片”“正电荷粘附载玻片”等都是它。使用防脱片并烤片都是防止检查过程中贴在载玻片上的组织脱落的手段。因此,那些直接在切片上操作的项目,如FISH、免疫组化,需要提供带胶白片或带正电荷的防脱载玻片制成的白片。烤片还为了将切片上多余水分烤干,避免组织被水损坏。对于荧光定量PCR、测序、HE染色等项目,普通白片即可,不需要带胶片或防脱片。
总之,要想得出准确的病理诊断,蜡块是重要的材料保证,HE切片是重要的材料基础,适当数量的白片和蜡卷也是少不了的。当然,在不确定检测/检查项目之前,选择白片好于蜡卷,选择胶片好于普通白片,选择4μm切片好于过厚切片。
你可知否?
毛成毅
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