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实验步骤石蜡切片HE染色

来源:石蜡 时间:2022/8/5
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1.结构包埋

(1)乙醇脱水:结构经不同浓度的乙醇溶液施行逐级脱水70%80%90%95%%%,各级乙醇40min(注重:骨性及钙化结构需在JYBL-Ⅱ脱钙液中浸泡24h,待结构软化后再施行乙醇脱水环节);

(2)透亮:结构挨次浸泡于三个二甲苯中,每缸各1h;

(3)漫蜡:结构挨次漫泡于三个白腊缸中,每缸各1h;

(4)包埋:将液态的白腊倒入模具盒中,再将浸好蜡的结构块平放底部,注重切面方位朝下安放,待白腊凝结后去偷换埋框,绝对冷却变硬后再休整蜡块,结构外围的白腊保存适中以便切片。

2.切片制做

将预冷的蜡块稳固在白腊切片机上,使蜡块的切面与刀口成平行方位,刀的歪斜度一般15℃,转移轮转推动器,调治切片厚度为4um,切成厚度匀称的切片。左手持羊毫,右手旋动切片机转把,切片带出来以后用羊毫悄悄托起,再用镊子轻镊蜡片,以正面放入展片箱中,其水温45℃左右。待铺平坦后捞片。贴附切片左手持载玻片之一端,笔直入水去附贴切片,右手用镊子辅佐推动,附贴至玻片上的三分之二处。切片贴附后,放在空气中稍晾干,安放65℃烤片机上烤1h,再安放烘箱内烘烤2h。

3.白腊切片脱蜡至水

挨次将白腊切片放入二甲苯I10min-二甲苯Ⅱ10min-二甲苯Ⅲ10min-无水乙醇I5min-无水乙醇Ⅱ5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-50%酒精5min梯度脱蜡。

4.HE染色

白腊切片入苏木素染0.5-1分钟min,自来水漂洗,1%盐酸酒精分裂数秒,自来水漂洗,而后1%氨水水溶液返蓝1min流水洗濯数秒放入伊红染液中染色数秒,流水漂洗。

5.脱水封片

白腊切片挨次放入75%乙醇2min-85%乙醇2min-无水乙醇5min-无水乙醇5min-二甲苯5min透亮,将切片从二甲苯拿出来中性树胶封片。

6.事实判读.

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