1
使用合适的脱水程序
?按照组织的类型和大小选择合适的脱水程序;
?使用不适合的脱水程序,比如:小组织长时间脱水,大组织或者脂肪组织脱水时间过短。
A、内窥镜活检(HE)脱水时间过长,组织变得很脆,导致大量的切片裂痕,而且切片技术不好会加剧这个现象;
B、镜下可见从大的脂肪样本中选取的皮下组织脱水不足,纤维脂肪组织浸蜡不充分,核界变得支离破碎。
2
提供额外的固定
?优质的脱水效果以及好的组织形态基于充分的固定,所以在脱水前中加入固定步骤;
?在没有充分固定的情况下,直接放入乙醇中产生“带状固定”(福尔马林固定的是样本表面,而乙醇则是固定更深层次的区域)。
A、骨髓穿刺“带状固定”图:左上部的红细胞完整,而右下角细胞则部分溶血;
B、三色染色的肝组织“带状固定”图:外层和里层的染色结果是不一样的。
3
确保试剂质量
?脱水试剂更换严格按照标准化的操作指南进行。
?不按照指南进行操作,忽略脱水试剂更换,这意味着使用无效的、受污染的或者浓度过低的试剂(比如忽略Peloris试剂管理系统“超过临界值”的警告),由此导致差的脱水质量。
从大皮肤样本中取出的切片,由于不充分的组织脱水导致大量胶原蛋白流失。这个案例很可能就是使用了严重污染的超过“临界值”的试剂
4
使用高质量的石蜡
?高质量的石蜡用于浸蜡和包埋,确保高质量的蜡块,易于切片;
?便宜的、低质量的石蜡产品进行浸蜡和包埋,导致切片困难。
蜡块冷却后进行缓慢的切片可以切成蜡带。图中虽然在低温下进行切片,切片仍有轻微的皱缩,主要是由于低质量的石蜡是切片不能很好的成片。
5
避免使用有毒试剂
?尽可能使用无二甲苯程序,在确保更安全的工作环境的同时也能获得最好的脱水效果;
?没有考虑二甲苯对身体的影响,不使用二甲苯替代物。
二甲苯替代物在保证操作人员的安全同时确保脱水质量。
以上内容主要就组织优化中组织脱水、透明、浸蜡作以指导,并作出操作规范和建议。
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