改良HE染色试剂盒
产品货号:R
产品规格:4×ml
产品简介:
苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-Eosinstaining),简称HE染色法,是病理学常规制片中最基本的染色方法。苏木精染液为碱性染料,主要使嗜碱性物质如细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使嗜酸性的细胞质和细胞外基质中的成分着红色。
染色过程需要根据具体实验样本进行优化,着色情况的不同与组织或细胞的种类不同有关,也随其生活周期及病理变化而改变。例如,很多细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱,当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时,伊红着色由浅变深。本产品所包含试剂均为工作液,可直接使用。新型试剂盒相比常规的,伊红和苏木素着色时间更短,颜色对比更鲜亮。
产品组成:
注意:环境温度低时,返蓝液可能会有结晶析出,将分化液37℃水浴融化10min后,吸取上清即可。
操作步骤:(仅供参考)
(一)石蜡组织切片染色
1.取材组织块,经固定后,常规石蜡包埋,切片。
2.石蜡切片脱蜡水化:
①二甲苯(Ⅰ)脱蜡10min。
②二甲苯(Ⅱ)脱蜡10min。
③无水乙醇(Ⅰ)2min。
④无水乙醇(Ⅱ)2min。
⑤95%乙醇2min。
⑥80%乙醇2min。
⑦70%乙醇2min。
⑧蒸馏水2min。
3.苏木素染液染色3-10min(具体时间根据染色结果和实验要求调整),自来水冲洗5-10s。
4.分化液分化1-5s,自来水冲洗20-30s,洗掉分化液即可。
5.返蓝液返蓝10s-1min,自来水冲洗20-30s,洗掉返蓝液即可。
6.伊红染色30s-2min(具体时间根据染色结果和实验要求调整),自来水冲洗1-5s。
7.脱水、透明、封片。
①80%乙醇(Ⅰ)2-3s
②90%乙醇(Ⅱ)2-3s
③95%乙醇(Ⅰ)2-3s
④95%乙醇(Ⅱ)2-3s
⑤无水乙醇(Ⅰ)2-3s
⑥无水乙醇(Ⅱ)1min
⑦二甲苯(Ⅰ)1min
⑧二甲苯(Ⅱ)1min
⑨中性树胶封固,镜下观察。
(二)冰冻切片或细胞染色
1.冰冻切片恢复室温后直接固定3-5min,水洗3-5min。
2.苏木素染色1-2min。
3.分化液分化10s,水洗1-2min。
4.返蓝液反蓝2-5min,水洗1-2min。
5.伊红染色30s-2min,自来水稍洗。
6.脱水,透明,封片:
①95%乙醇(Ⅰ)2-3s。
②95%乙醇(Ⅱ)2-3s。
③%乙醇(Ⅰ)2-3s。
④%乙醇(Ⅱ)1min。
⑤二甲苯(Ⅰ)1min。
⑥二甲苯(Ⅱ)1min。
⑦中性树胶封固,镜下观察。
染色结果:
细胞核呈蓝色;细胞质、纤维呈红色。
注意事项:
1.切片脱蜡应尽量干净。
2.系列乙醇应经常更换新液。
3.第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。
4.染色过程推荐浅染,通常只需能够分辨细胞核即可,颜色过深有可能影响细胞质颜色。
5.分化液的分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和盐酸乙醇分化液的新旧而定,另外分化后自来水冲洗时间应该足够,以便彻底清洗酸。
6.冷冻切片染色时间尽量要短。
7.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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