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改良HE染色试剂盒

来源:石蜡 时间:2023/1/28

改良HE染色试剂盒

产品货号:R

产品规格:4×ml

产品简介:

苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-Eosinstaining),简称HE染色法,是病理学常规制片中最基本的染色方法。苏木精染液为碱性染料,主要使嗜碱性物质如细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使嗜酸性的细胞质和细胞外基质中的成分着红色。

染色过程需要根据具体实验样本进行优化,着色情况的不同与组织或细胞的种类不同有关,也随其生活周期及病理变化而改变。例如,很多细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱,当其衰老时或发生退行性变则呈现嗜伊红浓染。胶原纤维在老化和出现透明变性时,伊红着色由浅变深。本产品所包含试剂均为工作液,可直接使用。新型试剂盒相比常规的,伊红和苏木素着色时间更短,颜色对比更鲜亮。

产品组成:

注意:环境温度低时,返蓝液可能会有结晶析出,将分化液37℃水浴融化10min后,吸取上清即可。

操作步骤:(仅供参考)

(一)石蜡组织切片染色

1.取材组织块,经固定后,常规石蜡包埋,切片。

2.石蜡切片脱蜡水化:

①二甲苯(Ⅰ)脱蜡10min。

②二甲苯(Ⅱ)脱蜡10min。

③无水乙醇(Ⅰ)2min。

④无水乙醇(Ⅱ)2min。

⑤95%乙醇2min。

⑥80%乙醇2min。

⑦70%乙醇2min。

⑧蒸馏水2min。

3.苏木素染液染色3-10min(具体时间根据染色结果和实验要求调整),自来水冲洗5-10s。

4.分化液分化1-5s,自来水冲洗20-30s,洗掉分化液即可。

5.返蓝液返蓝10s-1min,自来水冲洗20-30s,洗掉返蓝液即可。

6.伊红染色30s-2min(具体时间根据染色结果和实验要求调整),自来水冲洗1-5s。

7.脱水、透明、封片。

①80%乙醇(Ⅰ)2-3s

②90%乙醇(Ⅱ)2-3s

③95%乙醇(Ⅰ)2-3s

④95%乙醇(Ⅱ)2-3s

⑤无水乙醇(Ⅰ)2-3s

⑥无水乙醇(Ⅱ)1min

⑦二甲苯(Ⅰ)1min

⑧二甲苯(Ⅱ)1min

⑨中性树胶封固,镜下观察。

(二)冰冻切片或细胞染色

1.冰冻切片恢复室温后直接固定3-5min,水洗3-5min。

2.苏木素染色1-2min。

3.分化液分化10s,水洗1-2min。

4.返蓝液反蓝2-5min,水洗1-2min。

5.伊红染色30s-2min,自来水稍洗。

6.脱水,透明,封片:

①95%乙醇(Ⅰ)2-3s。

②95%乙醇(Ⅱ)2-3s。

③%乙醇(Ⅰ)2-3s。

④%乙醇(Ⅱ)1min。

⑤二甲苯(Ⅰ)1min。

⑥二甲苯(Ⅱ)1min。

⑦中性树胶封固,镜下观察。

染色结果:

细胞核呈蓝色;细胞质、纤维呈红色。

注意事项:

1.切片脱蜡应尽量干净。

2.系列乙醇应经常更换新液。

3.第一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。

4.染色过程推荐浅染,通常只需能够分辨细胞核即可,颜色过深有可能影响细胞质颜色。

5.分化液的分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和盐酸乙醇分化液的新旧而定,另外分化后自来水冲洗时间应该足够,以便彻底清洗酸。

6.冷冻切片染色时间尽量要短。

7.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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