来源:临床与实验病理学杂志
作者:杨小苗,申成香,司有谊,怀建国(安徽医院)
送检胸腹水标本通常处理方法是离心后涂片,95%乙醇固定染色后显微镜下阅片。在实际工作中发现该方法制出的切片镜下观察细胞不集中,且数量不多,如果发现可疑细胞,诊断医师则需冒很大风险去诊断该病。因此,我们把细胞沉渣石蜡切片及免疫组化技术应用于胸腹水的制片中,经过反复实验,发现送检胸腹水离心后,将沉淀物再处理,然后常规脱水、浸蜡、包埋、切片、染色后,细胞明显增多且集中,大大提高阳性诊断率,也提高诊断医师的阅片速度。
普通细胞涂片制作 送检胸腹水静置30min,弃上清液,留取底层液体25~50ml(视标本的情况而定,若送检胸腹水过于澄清,为保证细胞量足够,可全取),放入离心管,r/min离心10min,离心后用吸管吸掉上清液,取沉淀物上层细胞,滴于载玻片并涂片,待玻片中间部分稍干后放入95%乙醇内固定10~15min,常规HE染色。
细胞沉渣切片制作 送检胸腹水静置30min,弃上清液,留取底层液体25~50ml(视标本的情况而定,若送检胸腹水过于澄清,为保证细胞量足够,可全取),放入离心管,r/min离心10min,离心后用吸管吸掉上清液,向含沉淀物的离心管内加入10%中性福尔马林20ml,放入振荡仪,r/min振荡10min,r/min离心10min,倒去上清液用镊子取出沉淀物,用擦镜纸包好,常规脱水、浸蜡、包埋、切片、染色。
血性标本前处理 如果送检胸腹水中含血性成分较多时,则需对离心管内沉淀物进行清洗,以此去除红细胞,减少无关细胞的干扰。此时可加入冰醋酸与乙醇混合液20ml(25%乙醇95ml,冰醋酸5ml),混合后再离心,加入10%中性福尔马林固定、振荡离心等步骤。
细胞量较少的标本制作 如果送检胸腹水离心处理后发现细胞量较少,则可以利用蛋清液作为支架法制作细胞蜡块。标本离心沉淀后倒去上清液,向离心管中加入蛋清液1ml,尽量将底部细胞悬浮于蛋清中,r/min离心10min,去除多余蛋清,加入10%中性福尔马林2ml,轻轻摇动离心管,固定30min即可取出沉淀物,用擦镜纸包好,常规脱水、浸蜡、包埋、切片、染色。
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