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如何切出所需的石蜡切片

来源:石蜡 时间:2024/9/22
北京中科专家 http://www.zkyyhhyy.net/index.html

当我们研究生物体的组织或细胞时,除了某些生物体可用相差显微镜或偏光显微镜等方法达到观察目的外,其余大部分生物体,因为组织较厚,光线不易透过内部等关系达不到观察的要求,为了达到此目的,就必须将生物体的组织切成薄切片,使光线易于透过,即可进行观察。

组织化学中的组织切片主要有石蜡切片法、冰冻切片法和振动切片法等。

石蜡切片法比较节省时间,操作容易,可切极薄的组织片(4μm以下,通常为6~10μm厚的切片),能做连续切片,且组织块可包埋在石蜡中永久保存。但石蜡切片只能用于较小的组织块,不适用于大的组织块。

石蜡切片操作要点

1、切片前,把切片机上相关锁杆或螺旋拧紧,否则可能出现跳片、切片厚薄不均现象。

2、刮净包埋盒周边的余蜡,否则样品夹持可能松动,影响切片质量。

3、正确修块,先粗修,厚度大约在15-30微米,质地较硬的组织或较小的组织应再薄一些。粗修至组织全部暴露后,再进行细修。

4、择蜡块冷冻方式,冰盒优于冷冻台。使用冰盒能加水润湿蜡块,冷冻速度快,体积小,使用成本低,无须外接电源。

5、切片时轻握手轮,用力均匀轻柔,摇速不宜过快或过慢。过快会导致切片厚薄不均,切片难以展开;过慢会使切片增厚。切片要求完整、薄、均匀。

6、在切片后,先把切片放入冷水,再移至热水,这样片子会较薄,皱褶和气泡也少。展片水温应在42-55℃之间,这和包埋蜡的熔点有关。水温过高,会引起组织细胞散开,水温过低,切片皱褶无法摊平。

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