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RNAscope入门之可见光Red单染

来源:石蜡 时间:2022/7/11
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RNAscope技术是一种可在组织或细胞原位检测单一分子RNA的原位杂交技术。它是基于ACD专利的双zz型探针设计,寡核苷酸互补配对的信号放大系统,通过酶催化底物,可在显微镜下看到荧光或可见光的信号。

不仅实现了单一分子RNA的原位检测,还可实现在一张组织切片上最多标记4个不同的RNA分子。根据试剂盒的不同,分为荧光试剂盒和可见光试剂盒。该技术可以应用到多种类型的样本中,如石蜡包埋样本,冰冻样本,贴壁细胞,悬浮细胞样本等。

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RNAscope高清可见光Red单染试剂盒(#RNAscope?2.5HDReagentKit-Red

RNAscope高清可见光Red单染试剂盒优势

?单靶标RNA原位检测性价比高

?可见光在明场显微镜下就能看结果,可清晰的看到组织形态(细胞核和细胞质)

?任意样本类型:石蜡切片、固定冰冻切片、新鲜冰冻切片,贴壁细胞,悬浮细胞

?基于ACD专利的信号级联放大系统,灵敏度可达1-20个RNA拷贝

??类似IHC操作流程,无需RNase-free的环境,6-8h完成实验

?RNAscope可见光Kit可兼容RNA与IHC共染

?+篇文章支持,27%CNS高分文章比例!

RNAscope高清可见光Red单染检测工作流程(FFPE样本)

RNAscope与免疫组化IHC共检测工作流程

第一天:样本预处理后一抗4°C过夜孵育

第二天:RNAscope探针杂交2h,然后RNAscope试剂盒逐级信号放大检测完成;接着孵育HRP交联的二抗,最后加入FastGreen底物显绿色并封片采集信号

范例图像

图1.在肺癌石蜡切片中,使用RNAscop可见光单染试剂盒检测,左图为PPIB阳性探针结果,右图为靶标PDL-1表达分布。

图2.在猴子淋巴结组织中使用RNAscop可见光单染试剂盒检测SIV病毒发现SIV局限于淋巴滤泡高表达

FukazawaY,etal.NatureMedicine,

图3.在肿瘤石蜡组织切片中RNAscope可见光与蛋白IHC共检测PD-L1(RNA红色),CD45(Protein绿色)表达变化,以此分析免疫检查点标记共表达。

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