在样本制备的过程中，往往会应用一些试剂（如多聚甲醛、福尔马林等）对新鲜组织进行处理，这个过程可能导致抗原位点被封闭，为了避免影响后续免疫染色的效果，我们需要先对切片进行抗原修复。对于石蜡切片来说，抗原修复是不可或缺的步骤，常用的方法有酶消化法和热修复法。
1、酶消化法
作为最早的抗原修复方法，常用的消化酶有三：胰蛋白酶、胃蛋白酶、蛋白酶K。但酶的作用极易受温度影响，如果消化不足，则无法充分暴露出抗原位点，过度的消化又会破坏组织结构，影响最后阳性信号的判读，因此在后续的发展中，酶消化法渐渐被热修复技术所替代，但对于个别抗原，如免疫球蛋白、补体，以及在甲醛固定、石蜡包埋的肾活检中，酶消化法依旧不可替代。
2、热修复法
抗原热修复是采用高温、高压方法配合合适的抗原修复液，使得被固定液封闭的抗原位点重新暴露，提高抗体的阳性检出率。
最常用的抗原修复液有两种：柠檬酸钠缓冲液（pH=6）、EDTA缓冲液（pH=8或9），一般来说一抗的说明书都会写明需要选择哪种修复液。如果说明书没有推荐，柠檬酸钠缓冲液能够适配大部分的抗体，EDTA缓冲液相对修复效果更强，但阳性增强的同时也会提高非特异背景，一些比较难表达的抗体可以选择EDTA缓冲液。
常见热修复方法对比
小爱温馨提示，没有哪一种抗原修复液或者修复方法能够适配所有的抗体和样本，最佳条件还是需要在摸索实践中确定哦！
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