用途:
艾美捷m6ARNA甲基化片段富集试剂盒旨在富集RNA含有来自低输入RNA的m6A的片段,并通过PCR或谱鉴定区域特异性m6A通过使用Illumina平台或其他方法进行下一代测序,获得表转录体宽度m6A。该套件的创新工作原理、优化方案和组件允许捕获m6A片段具有最小的非特异性背景水平。富集的RNA适合于快速构建非条形码(单路)和条形码(多路)库,允许m6A区域以较小的偏差和高分辨率被映射。
输入量:
通常情况下,每个反应的总RNA量范围为1μg至20μg。对于最佳制备,输入量应为10μgRNA,但数据可从使用该试剂盒,总RNA低至ng。
起始材料:
起始材料可以包括各种哺乳动物细胞样品,如培养物来自烧瓶或平板的细胞、从血液、体液和新鲜/冷冻组织、从整个细胞群和胚胎细胞中分选的特定细胞等。
目前,有几种方法用于表转录体范围的m6A映射。这些方法包括MeRIP、PA-m6A-seq、miCLIP和m6ACLIP。MeRIP已被广泛使用,但无法实现m6A剖面中的高分辨率。PA-m6A-seq、miCLIP和m6ACLIP提高了剖面分辨率但再现性差,工艺复杂。特别是,这些方法耗时(2天)且成本高昂。为了解决这些问题,EpigenTek开发了一种新方法:切割并运行M6A富集(在靶下切割并使用核酸酶回收M6A富集)。
艾美捷m6ARNA甲基化片段富集试剂盒组分:
抗体:
艾美捷m6ARNA甲基化片段富集试剂盒中使用的抗m6A兔多克隆抗体对m6A具有高度特异性RNA片段,MeRIP级,不与腺嘌呤非甲基化RNA片段交叉反应。
内部控制:
本试剂盒中提供了阳性对照。
注意事项:
为避免交叉污染,小心地将样品或溶液移到试纸条中井。使用气溶胶屏障移液管吸头,并始终在液体转移之间更换移液管的吸头。穿在整个过程中戴手套。如果手套与样品接触,更换手套立即。
m6ARNA甲基化片段富集试剂盒相关研究:
RNA甲基化定量
P-甲基安培?RNA二硫化物转化试剂盒
P-EpiQuik?m6ARNA甲基化定量试剂盒(比色法)
P-EpiQuik?m6ARNA甲基化定量试剂盒(荧光法)
P-甲基闪光?m6ADNA甲基化ELISA试剂盒(比色法)
P-甲基闪光?尿N6甲基腺苷(m6A)定量试剂盒(比色法)
P-EpiNext?切割和运行RNAm6A序列试剂盒
DNA分离和清理
P-装配放大器?普通组织切片DNA分离试剂盒
P-装配放大器?血浆/血清DNA分离试剂盒
P-DNA浓缩试剂盒
P-装配放大器?石蜡组织切片DNA分离试剂盒
P-装配放大器?尿液DNA分离试剂盒
P-装配放大器?血液和培养细胞DNA提取试剂盒
DNA富集反应
P-甲基安培?甲基化DNA捕获(MeDIP)试剂盒
P-EpiQuik?羟甲基化DNA免疫沉淀(hMeDIP)试剂盒
P-EpiQuik?MeDIPUltra套件
P-EpiQuik?染色质免疫沉淀(ChIP)试剂盒
P-EpiQuik?组织染色质免疫沉淀(ChIP)试剂盒
年上半年EpiQuik?工厂ChIP套件
P-ChromaFlash?一步ChIP套件
P-ChromaFlash?一步磁性ChIP套件
P-ChromaFlash?ChIPUltra套件
P-EpiNext?ChIPSeq高灵敏度试剂盒
PCR分析
P-EpiQuik?定量PCR试剂盒
DNA文库准备
P-EpiNext?DNA文库制备试剂盒(Illumina)
P-EpiNext?高灵敏度DNA文库制备试剂盒(Illumina)
NGS条形码
P-EpiNext?NGS条形码(索引)集-12
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