福尔根DNA染色液（FeulgenStain）
产品货号：R
产品规格：3×ml
产品简介：
脱氧核糖核酸(DNA)染色方法有Feulgen法、甲基绿-派洛宁法、吖啶橙荧光法等，其中最经典的是Feulgen法,该法是一种经典的酶组织化学法。
FeulgenStain原理在于DNA经温和的弱酸(例如盐酸)水解后，嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键被打开，并且使脱氧核糖与磷酸间的磷酯键断开，在脱氧核糖的一端形成游离的醛基。醛基在原位与Schiff试剂结合，形成紫红色化合物，使细胞内含有DNA的部位呈紫红色。紫红色的产生是因为反应产物的分子内有醌基(醌基是一个具有颜色的发色团，所以凡含有DNA的部位就呈紫红色。该水解作用不影响核糖-嘌呤结合键，因此RNA用此法处理后则分解，所以该法不适用于证明RNA。
产品组成：
自备材料：
1.蒸馏水、系列乙醇
2.恒温箱
操作步骤:（仅供参考）
（一）石蜡切片染色
1.组织固定：Carnoy固定石蜡切片较好，10%福尔马林亦可，不宜采用Bouin固定液。
2.配制弱酸工作液:按弱酸溶液:蒸馏水=1:4配制，即取1份弱酸溶液、4份蒸馏水，充分混合，即获得弱酸工作液。
3.石蜡切片脱蜡至蒸馏水。
4.入弱酸工作液，室温浸洗一下。
5.切片入预热至60℃的弱酸工作液，孵育8min。
6.切片入室温的弱酸工作液中冲洗1min。
7.蒸馏水冲洗。
8.切片入SchiffReagent，室温避光染色30~60min。
9.在上述染色过程中，配制SO2水工作液。按弱酸溶液:亚硫酸盐溶液:蒸馏水=1:5:94配制，即取弱酸溶液1份、亚硫酸盐溶液5份、蒸馏水94份，充分混合，即配即用。
10.用新鲜配制的SO2水工作液洗切片3次，每次90s。
11.蒸馏水中洗净。经系列乙醇脱水。二甲苯透明并封片。
（二）冰冻切片染色
1.冰冻切片预处理：取1份乙酸、3份无水乙醇混合即为固定液，固定10min。
2.由无水乙醇脱水--逐级下行—蒸馏水。
3.配制弱酸工作液：按弱酸溶液:蒸馏水=1:4配制，即取1份弱酸溶液、4份蒸馏水，充分混合，即获得弱酸工作液。
4.余下步骤同上述石蜡切片染色。
染色结果:
细胞核内DNA红紫色
阴性对照：将同样切片经上述步骤，只有步骤5改为入室温弱酸工作液，孵育15min。结果为细胞核DNA阴性。
注意事项：
1.水解时间很重要，并且应使用恰当的固定时间。不同的固定液水解时间不一样。
固定液水解时间（min）
Carnoy固定液8min
Heiiy固定液8min
Susa固定液18min
福尔马林8min
Zenker液5min
2.注意SchiffReagent的纯净程度，若变浅粉红亦可考虑使用，颜色变红则弃用。
3.去除切片上多余SchiffReagent的方法以SO2水洗为好。
4.应做阴性对照试验。
有效期：6个月有效。
转载请注明：http://www.0431gb208.com/sjszlfa/9392.html
