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DNA产物纯化试剂盒说明书

来源:石蜡 时间:2024/12/28
北京中科皮肤病医院 http://www.bdfyy999.com/m/

DNA产物纯化试剂盒

产品货号:

产品规格:50次/次/次

产品简介:

本试剂盒采用新型硅基质膜技术和试剂配方,通过快速简单的结合-洗涤-洗脱三步即可从PCR产物或酶反应液(酶切,连接,探针标记等)中纯化回收70bp-30kb的DNA片段,每个吸附柱最高可吸附10μg的DNA,同时最大限度的去除引物、寡核苷酸、酶等杂质。纯化回收的DNA纯度及浓度高,完整性好,回收率高,可直接用于测序、连接和转化、标记、体外转录等分子生物学实验。

包装清单:

自备试剂:50次自备36ml无水乙醇/次自备72ml无水乙醇/次自备ml无水乙醇

操作步骤:

1.将估计DNA反应液的体积,加入5倍体积的BufferPG,充分混匀(无需去除石蜡油或矿物油)。

注意:如DNA反应体系为50l(不包括石蜡油体积),则加入lBufferPG。

2.柱平衡:向已装入收集管(CollectionTubes)中的吸附柱(SpinColumns)中加入μlBuffer

3.PS,10rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。

4.将步骤3或4所得溶液加入到已装入收集管的吸附柱中,室温放置2分钟,10rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。

5.向吸附柱中加入μlBufferPW(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),10rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。

注意:如果纯化的DNA用于盐敏感的实验(例如平末端连接或直接测序),建议加入BufferPW静置2-5分钟再离心。

6.重复步骤4。

7.10rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液。

注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。

将吸附柱放到一个新的1.5ml离心管(自备)中,向吸附膜中间位置悬空滴加50μlBufferEB,室温放置2分钟。10rpm离心1分钟,收集DNA溶液。-20℃保存DNA。

注意事项:

1.第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在BufferPW中加入无水乙醇。

2.所有离心步骤均可室温下进行。

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