根源:手术中病理诊断
制做一张杰出的冰冻切片,保证切片原料的同时,又要提能手术中赶快病理诊断的正确率,那末这跟对冰冻切片机的了解和抉择有很大干系。底下就罕用的冰冻切片机的分类、旨趣做浅显的整顿和概括。
冰冻切片机要紧分为两大类,即冰冻切片机(FreezingMierotome)和低温恒冷冰冻切片机(Cryostat)。
1.冰冻切片机
普遍是由轮转式切片机或推拉式切片机加之致冷安装而成的。罕用的致冷安装有二氧化碳冷冻安装和半导体冷冻安装。
(1)二氧化碳致冷器的基根源理是采纳二氧化碳气体凝结机关。切片机时时与一个二氧化碳钢瓶相接,负气体能通向切片机的载物台,有的还可通向切片刀。切片晌翻开二氧化碳气门,气体即经由管道喷出。由于洪量吸热,载物台(又称冷凝台)及其上的机关赶快冷却,切片刀的温度也响应下降,便可切片。机关和切片刀的温度可经由合适把持开关,转变二氧化碳气流的巨细实行调治。
(2)半导体致冷器的基根源理是操纵Peltier效应。Peltier查看到当直流电经由两种不同的金属时,即在这两种金属接壤的一个面造成热量,另一面耗费热量。依照这一旨趣做成热电微型元件,马上多个温差电偶按必定的按序胪列起来,造成一个较大的界面,当直流电经由期,电偶的一端发烧,另一端致冷。将这类安装用于冰冻切片,可将温度对比正确地把持到-30℃士0.1℃,并可持久坚持恒定。电偶吸热端和放热端之温差在必定领域内与电流的巨细成正比,电流越大,温差就越大。但电流高出必定领域后,温差反而下降。最大温差时经由电偶的电流即为“最好电流”,假若有轮回水等散热方法将放热端给以冷却,则吸热端的温度将随之降落,半导体冰冻切片便是操纵电偶的吸热端冷却机关,使之强硬而制做切片。
上述两种切片机都置于室温内实行切片,于是都具必定的限制性,如切片时时较厚,况且易与刀粘着,须要相当闇练的技术才华得到满足的切片。下表摆列了这类切片机的优缺陷。
2.低温恒冷冰冻切片机
50年月中期,发端有人将低温恒冷冰冻切片机用于病理诊断,使冰冻切片的原料和速率都有了很大的提升。
低温恒冷冰冻切片机理论上即是将经由纠正的切片机置于一个冷冻室内,与电冰箱致冷旨趣类似,操纵紧缩机经由氟利昂轮回致冷。切片机的操纵大部份在冷冻室外实行。今朝罕用的切片机为轮转式的。低温恒冷切片机又分为全紧闭式和顶部盛开式。顶部盛开式的切片机上部有一大的滑动玻璃窗,经由此窗放入机关,调换切片机,实行切片。本机能够自如抉择温度、切片厚度,制片赶快,能够不断切片,染片原料可与惯例白腊切片媲美,况且机关内的生物活性物资保管杰出,合用于机关化学、免疫荧光和免疫机关化学等染色。制片温度抉择可按机关表率及切片厚度而定,大普遍机关以-15℃~-20℃为好,脂肪机关所需温度更低,可加用干寒冬冻。
哄骗低温恒冷切片机实行切片,要得到好的薄片,也须要必定的前提。除了机关必需新鲜况且赶快冷冻外,低温恒冷切片机自己必需处于合适的形态,包含:①冷冻室,切片刀及机关平稳台必需处于最好切片温度。②切片机操纵必需切确。③防卷板调治必需切确。相关低温恒冷冰冻切片机切片的优缺陷扼要列于下表。
本机价值昂贵,须要用心调养和平稳的电源,机关不能来往水和水溶性平稳液(特为是酒精),免得冰晶过量。此种切片机内的温度调治可经由集成电路板上的各个显示安装,实行触摸式调治,从-4℃~-45℃。好的切片机除了冷室外,切片刀及机关平稳台的温度均能够按须要调治。普遍对外科病理来讲,低温恒冷切片机普遍日夜24小时处于备用形态,冷室温度保持在-25℃~-30℃,切片机和切片刀的温度保持于-19℃~-20℃左右,为最好机关切片温度,关于解决危急的手术中活检材料极度要紧。
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