欢迎来到格格巫魔法学院，很久没有更新了，除了最大的敌人——懒惰，还有就是事情实在太多了，忙得头晕目眩的，还请大家多多包涵。
趁着马上要回校处理毕业事务的间隙，更新一个同组小伙伴最近要操练的技术，助大家一臂之力。
参照大鼠或小鼠脑立体定位图谱或者文献确定脑内注射部位的坐标，包括前囟前或后的坐标，中线左或右的坐标，颅骨下深度。
（图示为大鼠脑图）
1.准备仪器耗材。（玻璃电极按需选择）
准备玻璃电极针头，玻璃管加热拉细后适当修剪尖端留6mm左右，用胰岛素注射器向玻璃电极中注入石蜡，注意勿注入空气。
针管抽吸1mm左右的石蜡，勿注入空气，将玻璃电极套入针头，注意保持垂直，用提前加热的热熔胶枪固定，勿使其移动。
2.麻醉动物。
6%水合氯醛，剂量：大鼠-mg/kg，小鼠mg/kg。实验中途有苏醒的迹象可适当补麻药。
3.脱毛膏脱毛，用清水清理暴露的皮肤。
4.固定动物。
先固定前面，将牙齿咬住后固定，注意前端固定不能太紧，易窒息。耳夹的尖端指向乳突，两侧对称。固定好后摇晃检查是否牢固。
小鼠：前端6-7mm，耳夹左右7.5-9mm，上下6-7mm。具体值视鼠情况而定。
5.涂抹眼膏，剪开头皮，用双氧水去除骨膜，暴露前后囟。
（图示麻醉方法为吸入麻醉）
6.玻璃电极前囟调0，可使用液滴辅助定位。
7.调平。
左右移动2，下移至平面记录z轴，左右调整直至z轴误差0.03以内。前后囟调平误差同样0.03以内。
也可肉眼估计着调平，效率更高，但可能会有误差，要求注射部位很准确的不建议使用。
8.抽吸病毒或药物
上移针管抽吸，rate10ul/min，withdrawal。一边打1ul可一次性吸2.5ul，注意调整仪器单位。
如果注入的是细胞一类的易沉淀的药物，需要分次抽吸。
9.定点打洞。
脑图找到目标坐标，调至坐标用油性笔在颅骨上标记，标记点左右观察确保与针尖垂直，使用转子在标记点上开洞，勿伤及脑组织。
10.入针注入病毒或药物。
入针出针要慢，一分钟左右，入针后适应5min，z轴可以颅骨下2mm为0点，rate0.1ul/min。
可通过观察药物和石蜡的分界液面变化，来判断针尖是否堵塞。
注射时注意关灯，给动物盖毯子保温，注意观察呼吸。
11.术后处理
缝合伤口，使用生理盐水润湿伤口边缘，碘伏消毒，电热毯上等待苏醒。
PS.没有做过的同志一开始可以使用墨水注射，打完之后立马取脑，以检查打得是否准确。
（小家伙们太冷了）
祝愿大家实验顺利！LOVE＆PEACE~
预览时标签不可点收录于合集#个上一篇下一篇