石蜡切片是最基本的切片技术,冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。苏木素与伊红对比染色法(简称H.E.对染法)是组织切片最常用的染色方法。
这种方法适用范围广泛,对组织细胞的各种成分都可着色,便于全面观察组织构造,而且适用于各种固定液固定的材料,染色后不易褪色可长期保存。
经过HE染色,细胞核被苏木素染成蓝紫色,细胞质被伊红染色呈粉红色。
实验步骤及注意事项
一、石蜡切片
1.取材:刀片要求锋利而薄,组织厚度约2—3mm,大小1.5×1.5×0.2~0.3cm为宜.取材时间越快越好.
2.固定:组织取下后应立即放入10%福尔马林(相当于4%甲醛)固定.
注意:
(1)固定液量应为组织块体积的40倍.
(2)固定时间固定时间与使用的固定液种类和组织块大小,温度等有关.一般为3—24h.
(3)固定温度大多可在室温固定,在低温(4℃)时间应延长.
(4)固定容器应大些.
3.漂洗:流水冲洗2—10h.
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