HE及免疫组化：正常组于造模后第12周，模型组及假手术组分别于术后1、4、8、12周行MRI检查后，取MRI测量ROI相应层面的新鲜肝组织适量，用10%福尔马林固定24h，石蜡包埋，制作组织切片，用于HE、免疫组织化学染色。免疫组织化学染色：石蜡切片脱蜡水化，3%H2O2室温孵育5～10min后PBS冲洗。滴加一抗，室温孵育30～60min后PBS冲洗。滴加通用型IgG抗体（Fab段）-HRP多聚体，室温孵育10～20min后PBS冲洗，小鼠固定架，小鼠固定器应用DAB溶液显色，蒸馏水冲洗、复染、脱水、封片。以PBS代替一抗作为阴性对照，采用已知阳性片作为阳性对照，阳性表达为结构清晰的细胞胞浆棕黄染色。
1.2.4Real-timePCR：肝组织液氮研磨后加入1mLTRIzol匀浆，严格按照说明书步骤提取总RNA，提取出的RNA逆转录合成cDNA，行Real-timePCR检测。PCR反应条件：95℃2min；95℃5s，60℃10s，40个循环。引物序列：β-actin上游序列：5,-CCCATCTATGAGGGTTACGC-3′，下游序列：5′-TTTAATGTCACGCACGATTTC-3′；HIF-1α上游序列：5′-TGACCACTGCTAAGGCATCA-3′，下游序列：5′-GGCTCCTTGGATGAGCTTTG-3′；NF-κB上游序列5′-AAGATCTGCCGAGTAAACCG-3′，下游序列：5′-TCCCGTGAAATACACCTCAA-3′；基因相对表达量以2-△△Ct计算。小鼠固定架，小鼠固定器。
1.2.5Westernblotting：肝组织细胞裂解、离心后收集上清液，按照1:4加入5XSDS-PAGE蛋白上样缓冲液。沸水浴加热10min，冷却到室温，上样到SDSPAGE胶加样孔内，每孔5～20μL。浓缩、分离后mA恒流转膜90min。漂洗5min，室温封闭2h。
一抗4℃孵育过夜，加入洗涤液（PBST），每次10min，共3次，相应二抗室温孵育2h。加入PBST洗涤液，每次10min，共3次。使用ECL试剂盒检测蛋白，以ImageJ软件分析条带灰度值，相对表达量依照内参照结果计算。小鼠固定架，小鼠固定器。
1.3统计学分析
采用SPSS22.0统计软件进行统计分析，计量资料以（±s）表示，同一时间点各组ADC值、HIF-1α、NF-κB比较采用单因素方差分析；模型组、假手术组组内各亚组比较采用单因素方差分析；两两比较采用LSD检验。ADC与HIF-1α、NF-κB相关性分析采用以Pearson法。以P＜0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1BCS模型小鼠固定架，小鼠固定器建模情况
正常组存活15只；假手术组术后1、4、8、12周亚组分别存活15、14、15、15只；正常组及假手术组活动如常、反应机警，DSA均无阳性表现。模型组术后1、4、8、12周亚组分别存活14、13、14、13只，活动逐渐减少、反应迟钝，毛色灰暗，存活小鼠固定架，小鼠固定器均成功建立BCS模型，肝后段IVC管腔变窄，远端扩张，4周后逐渐见侧支循环形成。
2.2BCS模型大鼠MRI表现
各组大鼠常规MRIT1WI扫描肝实质信号均匀，肝表面光整。正常组与假手术组ADC值差异无统计学意义（P＞0.05）；正常组ADC值均高于模型组（P＜0.05）；模型组与假手术组ADC值整体差异有统计学意义，随后两两比较，模型组均低于同一时间的假手术亚组（P＜0.05）。小鼠固定架，小鼠固定器。
模型组ADC值随时间进展先下降后升高，差异有统计学意义（P＜0.05；随后各亚组间两两比较，1周组高于4周组、1周组高于8周组、4周组低于12周组，差异均有统计学意义（P＜0.05），ADC值在4周组最低。
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