吕叶辉1，2，3，黎世莹2，李志宏1，
陶瑞旸2，3，邵煜2，胡茜1，
杨智昉1，陈忆九2，3
（1.上海健康医学院基础医学院，上海；
2.司法鉴定科学研究院上海市法医学重点实验室
上海市司法鉴定专业技术服务平台，上海；
3.四川大学华西基础医学与法医学院，四川成都）
摘要目的：定量分析并对比冻存器官和甲醛固定石蜡包埋（formaldehyde-fixedandparaffin-embedded，FFPE）组织中核糖核酸（ribonucleicacid，RNA）的表达情况。
方法：选取不同死亡时间人体脑、心肌和肝组织的冻存及FFPE样本，提取并检测RNA质量浓度，运用实时荧光定量反转录聚合酶链反应（reversetranscription-quantitativepolymerasechainreaction，RT-qPCR）技术分析各RNA指标的扩增效率及相对表达量。
结果：与冻存样本相比，FFPE样本中所提取RNA的质量浓度和完整性相对较低。各RNA指标扩增效率与RNA种类及扩增产物长度有关，其中扩增产物较长的甘油醛-3-磷酸脱氢酶（glyceraldehyde-3-phosphatedehydrogenase，GAPDH）及β-肌动蛋白（β-actin，ACTB）扩增效率不理想，而5S核糖体RNA（5SribosomalRNA，5SrRNA）扩增效率理想且在各组织中表达稳定，故选为内参指标。较长死亡时间的冻存样本及FFPE样本中扩增产物较长的GAPDH及ACTB表达量下降，而组织特异性微小RNA（microRNA，miRNA）以及扩增产物较短的GAPDH和ACTB在同一组织冻存和FFPE样本中表达具有一致性。
结论：通过标准化RT-qPCR实验，选取合适的RNA指标及设计合适产物长度的引物，能够准确定量FFPE样本中RNA的表达水平。
关键词：法医病理学；核糖核酸；石蜡包埋；冷冻保存；反转录聚合酶链反应；核糖核酸完整性指数
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