EDTA脱钙液
产品货号:E
产品规格:ml/ml
产品说明:
一些组织内含有骨质或钙化灶时,含钙的组织不宜直接用石蜡包埋切片。这是因为钙和石蜡之间的密度不同,较难切除完整的切片。对含钙组织最好固定之后,再进行脱钙或二者同时进行。然后进行下游的实验,如脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。用于脱钙的试剂很多,脱钙剂包括有机酸、无机酸、乙二胺四乙酸(EDTA)以及电解法脱钙。
EDTA是一种相对较好的螯合脱钙剂,对组织结构影响最小,可以较好的保存组织的某些酶类,经EDTA脱钙后的组织可以进行免疫组化和原位杂交染色。但是该法脱钙速度太慢,一般脱需要数周至数月。
EDTA脱钙液优点:①经EDTA脱钙的组织染色结果好;②对组织的结构损害小;③用化学方法测试可以确定脱钙的终点。
EDTA脱钙液缺点:①脱钙速度很慢,不适合常规标本脱钙使用;②脱钙后组织会稍微变硬。
产品组成:
主要成分:主要由EDTA、磷酸盐等组成,用NaOH溶液调pH值为7.2。
自备材料:
1.PBS。
2.蒸馏水。
3.加热装置或微波炉。
操作步骤(仅供参考):
1.骨组织脱钙时,取材不易过厚,一般大约5mm。
2.组织固定后,用PBS清洗3次,每次20min。
3.组织用蒸馏水洗清洗3次,每次20min。
4.组织转移至20~30倍体积的EDTA脱钙液中,脱钙10~30天或更长时间。如果想加快脱钙速度,可以置于37℃进行脱钙。如果必要,更换新的EDTA脱钙液继续脱钙,多数组织脱钙2周~3个月即可,每周更换一次,直至终点。亦可采用微波快速脱钙法:微波炉设在W左右的档位,每次加热5min,依据组织厚度和密度重复3~5min,中间间隔3~5min。
5.用蒸馏水冲洗数次。
6.常规脱水、包埋。
注意事项:
1.厚度5mm的骨组织块脱钙时间一般脱钙10~30天即可。
2.适当加温能加快脱钙的速度,一般不应超过37~40℃,温度过高容易使骨组织造成松散解体,尤其不可大于60℃。脱钙应彻底,防止脱钙不足或过度。脱钙程度应控制在不影响组织切片的同时尽量缩短脱钙时间,以免脱钙过长引起组织损害。
3.脱钙用具避免使用金属容器,尽量使用玻璃容器。
4.骨组织脱钙应先固定后脱钙或脱钙固定同时进行,不应先脱钙后固定,以便减少组织的损伤程度。
5.每隔一段时间检测一次脱钙程度,避免脱钙过度,脱钙过度会增加组织的损伤程度,影响染色结果。
6.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:12个月有效。
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